血栓弹力图试验标准操作规程(凝固法)

1检验目的

检测全血的凝血功能，评估包括血浆、血小板、红细胞在一起参与的凝血全貌。

2检验原理

血栓弹力图试验（活化凝血）试剂（凝固法）通过表面激活机制激发内源性凝血途径（XII因子），使血液发生凝固。高岭土可作为表面触活剂（内源性途径）来激活XII因子，增强血液的凝结能力。血栓弹力图仪监测血凝块的某一物理性质，即切应力。因此，他对所有影响血凝块的结构或速率及其溶解的细胞和血浆成分之间的相互作用均很敏感。血凝块进行有用的机构工作（凝血工作）这一能力是参与凝血过程的凝血蛋白及细胞成分相互作用的共同结果。实际上，血栓弹力图仪用于测量血凝块在其结构变化发展过程中的机械工作力。血凝图能够以血液的低凝、正常凝血或高凝状态以及溶解度来进行定量或定性分析。

3所需器材

重庆鼎润DRNX--III弹力图分析仪、样品杯、DRAGONLAB加样枪100--1000μl、SANCH加样枪10-100μl、镊子、记号笔、Qiu Jing加样枪200--1000μl。

4试剂

TEG试剂盒（凝固法），氯化钙溶液。

5标本准备

用枸橼酸钠真空采血管（3.2%的枸橼酸钠1:9，推荐使用BD公司真空采血管）按要求采取患者血液，采完血后轻轻地上下翻转采血管5次，使血与枸橼酸钠混合。室温放置15min后及时上机测试，应在2h内完成测试。完成实验的最小用血量：枸橼酸钠抗凝血1mL。

6工作条件

室内使用：

环境温度：15-30℃；

相对湿度：小于等于85%;

大气压力：700hpa-1060hpa;

工作电压：-220V,50Hz；

输入功率：100VA（主机、工控机）；

污染等级：2级；

使用海拔高度：不超过3000m；

应避免外界的振动、噪声、电磁场干扰，光照适当

7操作程序

7.1从冰箱取出TEG试剂盒（凝固法）与样品杯，室温平衡10分钟。

7.2打开DRNX---III电源开关，待温度逐渐上升到37℃。

7.3配制全血标本：吸取1000ul全血加入试剂瓶中，颠倒混匀3-5次，静置3分钟。

7.4电脑操作软件--选择管理员输入密码：dr5000，选择“操作员”点击选项--维护。并将手柄拨至锁定位置，选中通到1， 点击 eTest。选中通道2，点击eTest， 待1、2通道显示“eTestvalueis OK”，点击“执行”。

7.5点击操作界面----选择通道。输入患者者信息：输入姓名后后双击回车键，输入ID后点击执行，样本类型：CK-普通检测，建立标本编号，如“601”

7.6上杯将样品杯置于杯槽中，在仪器的测试界面点击对应通道“上杯”键上杯。样品杯中加入CaCI2试剂20ul。

7.7 轻柔摇匀试剂瓶血液，加入340μl混匀的血液标本，加入样品杯中，单击选中通道上的“检测”按键，开始检测样本，待该通道MA或所需参数无*后 并且EPL和LY30均在参考范围内，点击选中通道号，然后点击 Stop 按钮。

7.8选中“单个结果导出”，数据和结果传出到LIS, 然后在LIS系统中审核结果，核准出报告。

7.9卸杯将控制杆移到“卸载”位置，点击“脱杯”，同时向下按压手柄，此时杯盖与探针脱离，用镊子夹住杯槽放入黄色垃圾桶。按照当地卫生局的程序处理用过的生物制品; 推荐用镊子将其夹取丢弃至合理容器; 如有血迹洒落，请用医用酒精棉签擦拭干净，以防对操作者产生感染危险。

8参考范围

8.1R（min），指血液置入血栓弹力图仪开始到第一块纤维蛋白凝块形成（描记图幅度达2mm)所需的时间（min),反映参加凝血过程（内源性、外源性和共同途径）所有凝血因子的综合作用。 R值可因使用抗凝血剂或凝血因子缺乏而延长，可因血液呈高凝状态而缩短。

8.2 Angle(deg) ,是反映纤维蛋白和血小板在凝块开始形成时的共同作用结果。从凝血块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角，是反映凝血块聚合的速率。Angle 的大小受纤维蛋白原水平高低的影响，而受到血血小板功能的影响则较小。抗凝剂可延长Angle.（备注：在血栓弹力图仪上的K与Angle表达的意义相同，但是当凝血处于重度低凝状态时，血块幅度到不到20mm,此时K无法确定。因此，Angle比K更有价值。）

8.3 MA(mm),是血栓弹力图仪上的最大振幅，即最大切应力系数（mm).反映正在形成的血凝块的最大强度及血凝块形成的稳定性。MA主要受纤维蛋白原及血小板两个因素的影响，其中血小板的作用（约占80%）要比纤维蛋白原（约占20%）大，血小板质量或数量的异常都会影响到MA值。

8.4 产品性能指标

8.4.1准确性

用质控血浆测试试剂盒，其R、K，a、盒MA结果应在给定的靶值范围内。

8.4.2重复性

用同一样本测试试剂盒，重复测试10次，所得结果R、K、a和MA的变异系数（CV）应不大于10.0%。。

8.4.3线性

同一键康人采用不同的肝素浓度(1U/Ml-6u/Ml)肝素化后血样测量的TEGR值与加入肝素浓度的线性相关系数应不小于0.97.。

8.4.4灵敏度

灵敏度为：A30值为Imm(即X+2SD小于等于Imm).

8.4.5批间差

DRNX--III血栓弹力图仪与不同批号的试剂配套使用测定同一质控品，R、K、a和MA的批间相对极差小于等于10%。

报告看图顺序：LY30（EPL） → CI→R→ MA→ Angle(K).

9 干扰因素

9.1 严重的黄疸或脂血使结果异常；

9.2 中毒患者血液如蜂毒蛰伤，毒蛇咬伤可使结果测不出。

10维护和保养

用户必须执行本章提供的维护和保养程序，从而保证仪器在正常运行及获得可靠的检验结果。

日常维护保养清洁设备之前应识别具有生物危害的区域，并带上橡胶手套。每日实验之前，按7.4的要求对仪器进行基线效准。每半年进行一次弹力的校准。每周清洁仪器外壳，用拧干的湿棉布擦拭干净即可。通道部分的清洁要注意，用干净的棉球蘸75%的酒精进行清洁，注意在清洁之前将手柄移到“锁定”位置，不要接触探针。建议每周清洁一次，若试验样本较多可按实际情况每周清洁2-3次。清洁时动作应轻柔，避免搬动仪器。

12警告/危急值

受检者出现低于或者高于参考范围时，应及时通知临床医生，必要时通知患者或家属。

13其他注意事项

血样收集：不要将进行凝血激化检测试剂测试的血样收集在肝素管中，或任何未经推荐使用的试管中。

样品混合：杯中的试剂与样本必须用吸管混合三次。

检测时间：非枸橼酸化的血样应在4分钟之内开始检测，以防止样品凝血。

不用时应将试剂冷藏。

14参考文献

14.1 重庆鼎润DRNX--III血栓弹力图仪说明书：

14.2 万学红等.诊断学，人民卫生出版社，2013年第8版。